Q Strong Anion Membrane Chromatography
video
Q Strong Anion Membrane Chromatography

Q Strong Anion Membrane Chromatography

1.Pregled Kromatografija jonske izmjene je tehnika prečišćavanja koja razdvaja biomolekule na osnovu razlika u njihovim svojstvima naboja i količini naboja. Budući da većina bioloških makromolekula sadrži karboksilne ili hidroksilne grupe, njihove karakteristike naboja i veličina mogu se podesiti...

Uvod u proizvod

product-800-800
1.Pregled

Kromatografija ionske izmjene je tehnika pročišćavanja koja razdvaja biomolekule na osnovu razlika u njihovim svojstvima naboja i količini naboja. Budući da većina bioloških makromolekula sadrži karboksilne ili hidroksilne grupe, njihove karakteristike naboja i veličina mogu se podesiti kontrolom pH vrijednosti puferske otopine. Nakon što se biomolekule vežu na suprotno nabijeni medij za anionsku ili kationsku izmjenu, razdvajanje se postiže promjenom jonske snage ili pH mobilne faze, uzrokujući da se prvo eluiraju slabo vezane molekule, a zatim snažno vezane molekule.

 

2. Prednosti proizvoda

2.1 Brz i efikasan - postiže visok kapacitet vezivanja pri protoku do 40 puta brže od tradicionalnih smola. U poređenju sa hromatografijom sa upakovanim slojem{4}}, vrijeme procesa upotrebom membranske hromatografije je smanjeno za 30-40 puta. Tipični radni protok je 10 MV/min.

2.2 Visoka efikasnost vezivanja - membranska hromatografija pokazuje visok kapacitet punjenja i velike brzine protoka u uslovima niskog pada pritiska, omogućavajući da se nabijeni biomolekuli zarobe u jednom prolazu.

2.3 Skalabilan i fleksibilan - puna serija proizvoda za membransku hromatografiju može zadovoljiti različite potrebe prečišćavanja biomakromolekula, pokrivajući sve faze od razvoja procesa do-proizvodnje velikih razmjera. Strukturalni dizajn tipa kapsule- podržava i jednokratnu- upotrebu i ponovnu upotrebu nakon čišćenja.

2.4 Poboljšajte produktivnost - Kompaktan dizajn minimizira otisak objekta. Eliminacijom operacija pakovanja kolone, čišćenja, validacije čišćenja i skladištenja kolone, proces zahteva manje pufera za ekvilibraciju i može se izvesti direktno bez pripreme kolone. Troškovi rada mogu se smanjiti i do 50%.

 

3. Tehnički parametar

3.1 Konstrukcijski materijal

 

Laboratorijska skala

male skale

pilot skala

obim proizvodnje

volumen membrane

0,2ml

5ml

140ml

5L

Struktura nosača membrane:

polipropilen (PP)

membransko kućište

polipropilen (PP)

O prsten

silikona

 

3.2 Radne karakteristike

 

Laboratorijska skala

male skale

pilot skala

obim proizvodnje

volumen membrane

0,2ml

5ml

400ml

5L

Preporučeni protok

1-6ml/min

25-150ml/min

2-12L/min

25-150L/min

Maksimalna radna temperatura

35 stepeni

Maksimalni radni pritisak

3bara (25 stepeni)

Maksimalna razlika pritiska

3bara (25 stepeni)

Uslovi skladištenja:

20% vodeni rastvor etanola

 

Vek trajanja Q membranske hromatografije je uporediv sa hromatografijom na agaroznom gelu.

product-806-441

product-800-800
product-800-800

 

 

Slika 1. Promjene u kapacitetu membranske hromatografije nakon višestrukih upotreba koje prati BSA

Dodatno, procijenili smo efikasnost uklanjanja membranske hromatografije za proteine ​​ćelije domaćina i nukleinske kiseline. Rezultati su sljedeći.

 

DNK

HCP

 

IgG oporavak

Sadržaj (pg/mg IgG) pomoću RT PCR

Faktor uklanjanja

Sadržaj (ng/mg IgG) od strane Elise

Faktor uklanjanja

Trči

%

Prije Q membrane

Nakon Q membrane

Dnevnik

Prije Q membrane

Nakon Q membrane

Dnevnik

1

96.7

423

1.2

2.55

7

4.8

0.16

2

97.4

438

1.3

2.53

7

4.9

0.15

3

94.7

513

1.3

2.60

6

1.9

0.50

4

95

32

0.9

1.55

6

4.2

0.15

5

96.3

45

1.1

1.61

8

5.2

0.19

6

96.5

158

0.7

2.35

8

6.2

0.11

7

96.4

267

1.9

2.15

9

7.2

0.10

8

96.8

298

2.3

2.11

9

8.2

0.04

9

97.1

746

1.5

2.70

4

2

0.30

10

96.6

39

1

1.59

4

1.5

0.43

Tabela 1. Stope uklanjanja DNK i proteina ćelije domaćina u CHO-izraženom IgG materijalu korištenjem Q membranske hromatografije

 

Niz eksperimenata je pokazao da Q membranska hromatografija može efikasno ukloniti nečistoće uz održavanje visokog ciljanog IgG oporavka.

Osim toga, usporedili smo Gudiling membransku hromatografiju sa uvoznim markama, a podaci o kapacitetu punjenja su sljedeći:

Kapacitet punjenja (mg/ml)

Sartorius

PALL

Guidling

BSA

29

60

45

SOD

25

40

35

Protein A

27

45

40

Tripsin

30

56

44

Tabela 2. Performanse učitavanja različitih proteina na našem proizvodu i proizvodima konkurencije

Ukupna procjena pokazuje da je naš kapacitet utovara uporediv sa uvoznim proizvodima,

product-1119-279

Slika 2.Koristeći Q membranski hromatografski modul, BSA je korišten kao standardni protein za procjenu kapaciteta vezivanja. Upoređen je dinamički kapacitet vezivanja sa kapacitetom uvoznih proizvoda. Rezultati su pokazali da se većina ciljnog proteina može uhvatiti i eluirati sa njim150 mM NaClkada koristite BSA kao model proteina.

Through different elution conditions, we found that the elution behavior of membrane chromatography is similar to that of agarose gel chromatography. The purity of proteins eluted at different salt concentrations varies significantly. In actual process development and production, it is necessary to quantitatively determine the optimal elution conditions in order to obtain the target protein with high purity.

 

4.Tipičan slučaj primjene

Uklanjanje DNK, virusa, proteina ćelije domaćina (HCP) i endotoksina

Hvatanje plazmida, virusa i proteina, kao i pročišćavanje oligonukleotida

 

5. Operativni postupak

5.1: Priprema i montaža opreme:

5.1.1: AKTA hromatografski sistem: Instalirajte modul za membransku hromatografiju na način sličan napakovanim kolonama. Uvjerite se da je smjer strelice na modulu u skladu sa smjerom protoka hrane. Povežite sistem pomoću Luer konektora ili Tri-priključaka.

5.1.2 Podesite ulazni protok na 5–10 MV/min i koristite pufer za ekvilibraciju da uklonite vazduh iz sistema. Nakon što se uvjerite da u izlaznom toku nema mjehurića zraka, spojite izlaz permeata na hromatografski sistem.

5.2:Pre-tretman:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV kako bi se osiguralo da membrana postigne ravnotežu.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV kako bi se osiguralo da membrana postigne ravnotežu.

5.3 Proces hromatografije

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV dok membrana ne postigne ravnotežu.

5.3.2 Nakon što se uzorak prethodno-filtrira kroz filter od 0,22 μm, ubacite ga na kolonu dok se ne nanese cijeli uzorak ili se dostigne kapacitet vezivanja hromatografije.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV dok UV signal ne padne na osnovnu liniju.

5.3.4 Izvršiti gradijent ili linearno eluiranje prema dizajniranom protokolu i prikupiti frakcije po potrebi.

5.4 CIP tretman nakon{1}}upotrebe – uređaj za membransku hromatografiju CIP

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV dok UV signal ne padne ispod osnovne linije.

5.4.2 Nakon cirkulacije od 30 minuta, pređite na pranje vodom dok pH ne dostigne 7-8, zatim pređite na 20% etanol i nastavite sa pranjem dok se provodljivost ne stabilizuje.

5.5, Membranska hromatografija Skladištenje:

Nakon upotrebe i završetka CIP-a, membranski modul se može rastaviti i pohraniti u 20% etanolu, ili držati na mreži na sobnoj temperaturi u 20% etanolu. Otopinu etanola treba povremeno mijenjati i pregledavati.

 

6. Informacije o naručivanju

Q Strong Anion-Filter kapsule za hromatografsku izmjenu membrane

 

Laboratorijska skala

male skale

pilot skala

obim proizvodnje

Model proizvoda

IEXQ0002ES

IEXQ0050ES

IEXQ0400ES

IEXQ5000ES

volumen membrane

0,2ml

5ml

400ml

5L

Popularni tagovi: q hromatografija jake anionske membrane, Kina, dobavljači, proizvođači, fabrika, veleprodaja, rasuti, na lageru, besplatni uzorak

Moglo bi vam se i svidjeti

(0/10)

clearall