Guidling tehnologija donosi vam da naučite jednostavnu i efikasnu metodu desalinizacije i koncentracije
Proteini se često moraju odsoliti nakon odvajanja i pročišćavanja, a ove soli uglavnom potiču iz različitih jona u živim organizmima (npr. joni natrijuma, kalijevih jona, kloridnih jona, itd.), kao i puferskih soli u ekstraktima, soli u eluensi i komponente soli određenih denaturanata koji se koriste za eksperimente. Visoka koncentracija soli može uticati na aktivnost i stabilnost proteina kao i na njihovu interakciju sa drugim molekulima, generišući ometajuće signale ili smanjujući tačnost merenja u kasnijim analitičkim metodama kao što su elektroforeza, masena spektrometrija i kristalografske studije. Stoga je vrlo potrebno odsoliti pročišćene proteine nakon odvajanja, a glavne metode odsoljevanja koje se često koriste su membranska (dijaliza i ultrafiltracija) i gel filtracijska hromatografija. Osim toga, u nekim slučajevima, desalinizacija se može postići i razrjeđivanjem.
Desalinizacija dijalizom, zbog dugog ciklusa i potrebe za velikim brojem zamjenske tekućine, njegova primjena je uvelike ograničena, a manje se koristi u industriji, ali se uglavnom dijelom koristi u laboratoriji, laboratorij se također postepeno zamjenjuje ultrafiltracijskim cijevima /ultrafiltraciona šolja.
Glavna tehnologija membranske separacije koja se koristi u procesu odsoljevanja i koncentracije proteina je ultrafiltracija. Ultrafiltracija je tehnologija membranske separacije sa visokom efikasnošću, malom potrošnjom energije, bez promjene faze, bez potrebe za dodavanjem bilo kakvih kemijskih reagensa, lakim radom, blagim uvjetima, sposobnošću koja može bolje održavati aktivnost bioloških makromolekula, visokom stopom oporavka i drugim prednostima , a njegova upotreba u odvajanju i prečišćavanju proteina ima jedinstvene prednosti.
Ultrafiltracija je metoda membranske filtracije koja koristi poroznu membranu kao medij za razdvajanje i oslanja se na razliku tlaka između dvije strane membrane kao pokretačku silu za odvajanje tvari različite molekularne težine u otopini, igrajući tako ulogu u desalinizaciji, koncentraciji i pročišćavanje. Ovo je nova metoda razvijena posljednjih godina, koja je najpogodnija za koncentraciju ili desalinizaciju bioloških makromolekula, posebno proteina i enzima. Ključ za primjenu ultrafiltracije je izbor membrane, različite vrste i specifikacije membrane, imaju razliku u brzini protoka vode, graničnoj molekulskoj težini i drugim parametrima, mora se odabrati prema relevantnim potrebama rada. Osim toga, oblik uređaja za ultrafiltraciju, sastav i svojstva otopljene tvari, koncentracija otopine itd. imaju određeni utjecaj na učinak ultrafiltracije.
Primenu ultrafiltracione tehnologije za odsoljavanje i koncentriranje proteina u procesu prečišćavanja proteina karakteriše njena pogodnost za tretman velikih količina tečnosti od nekoliko stotina do nekoliko hiljada litara uz prednosti jednostavnosti rada, uštede vremena i visoku stopu oporavka proteina. Metoda ultrafiltracije je sazrela iz ultrafiltracionih cevi za laboratorijsku obradu mikro-volumena, ultrafiltracionih čaša za obradu male zapremine i ultrafiltracionih sistema za industrijsku upotrebu.
Ultrafiltracija se dijeli na ultrafiltraciju s direktnim pritiskom i filtraciju tangencijalnog protoka, a trenutno se tangencijalna filtracija protoka uglavnom koristi u industriji, koja se široko koristi u desalinizaciji i zamjeni pufera.
Slijedi primjer primjene Guidling Technology ultrafiltracijskih membranskih kaseta u desalinizaciji i koncentraciji proteina.
Koristili smo {{0}}.11㎡ membransku kasetu veličine pora od 10 kd (G01100010K) da odsolimo i koncentrišemo 500 mL PEG-modificiranog rastvora hormona rasta u koncentraciji od 0,2 mg/mL. Tokom procesa ultrafiltracije, ispitana je brzina desalinizacije, stopa obnavljanja proteina, stanje kvara membranskog fluksa i stopa obnavljanja toka vode.
Prije i nakon upotrebe, testirali smo protok vode membranske kasete odvojeno, a stopa oporavka membranskih kaseta dostigla je 98% pod pretpostavkom održavanja iste brzine dovoda, pritiska napajanja i refluksnog pritiska.
Cijeli proces je obradio ukupno 2L materijala i trajao je 40min, 0-5min je bio proces koncentracije, 5-35min je bio proces izmjene tekućine, a 35-40min bio je proces prekomjerne koncentracije. Tokom procesa ultrafiltracije, TMP je stabiliziran između 0.7-0.8 bara, brzina dodavanja je bila konstantna, a prosječni protok materijala bio je 27 LMH.
2L materijala koncentrirane tekućine zamjenjuju se na 60mL, oko 33 puta koncentrirane, stopa desalinizacije dostiže 99%, stopa oporavka dostiže 80%, nakon pranja, povećanje od 50mL tekućine, ukupni oporavak od 88%, industrijska proizvodnja prema mrtvi volumen cjevovoda kalkulacije, koliko god je to moguće da se poveća broj puta gornjeg pranja, generalno gornje pranje 3 puta može se potpuno oporaviti.
Guidling Technology membranske kasete su napravljene od inertnih materijala medicinskog kvaliteta sa jakom otpornošću na koroziju i mogu izdržati jako alkalno čišćenje; korištenje automatiziranog procesa proizvodnje osigurava kontinuitet i kvalitetnu pouzdanost proizvoda, veću mehaničku čvrstoću, otpornost na povratni pritisak i performanse ponovljenih ispiranja; ima super hidrofilnost, što može dati membrani veći protok i nižu adsorpciju proteina; takođe imamo optimizovan dizajn protočnog kanala sa manjim padom pritiska koji olakšava prenos materijala i značajno skraćuje vreme filtracije.
Naše membranske kasete su dostupne u širokom rasponu veličina pora, od 1kd do 1000kd. Među njima, 1-10kd ultrafiltracione membranske kasete se mogu koristiti za desalinizaciju i uklanjanje pirogena; 30kd ultrafiltracione membranske kasete mogu se koristiti za koncentraciju monoklonskih antitijela i zamjenu pufera; Istovremeno, naši proizvodi od šupljih vlakana mogu se koristiti i za koncentraciju i zamjenu bioloških lijekova, s veličinom pora od 100 kd, 300 kd i 500 kd, koji se uglavnom koriste za veliki broj primjena u proizvodima cjepiva.
Guidling Technology je nacionalna kompanija visoke tehnologije koja se fokusira na biofarmaceutike, ćelijsku kulturu, prečišćavanje i koncentraciju biomedicine, dijagnostiku i industrijske tekućine. Uspješno smo razvili centrifugalne filter uređaje, ultrafiltracione i mikrofiltracione kasete, virusni filter, TFF sistem, dubinski filter, šuplja vlakna, itd. Koji u potpunosti zadovoljavaju scenarije primjene biofarmaceutika, ćelijske kulture itd. Naše membrane i membranski filteri se široko koriste u koncentraciji, ekstrakciji i odvajanju predfiltracije, mikrofiltracije, ultrafiltracije i nanofiltracije. Naše brojne linije proizvoda, od malih, za jednokratnu upotrebu laboratorijske filtracije do proizvodnih sistema filtracije, testiranja sterilnosti, fermentacije, ćelijske kulture i više, zadovoljavaju potrebe testiranja i proizvodnje. Guidling Technology se raduje saradnji sa vama!